Citrulinación endógena y homólogos de PADs/ADs en miembros de la microbiota humana y anticuerpos anti-zonulina de pacientes con artritis reumatoide

Abstract

Introducción: El Microbioma humano es esencial en diversos procesos fisiológicos, incluida la inmunidad, no obstante, eventos disbióticos y aumento en la permeabilidad intestinal (PI) conducen al desarrollo de enfermedades autoinmunes (EAI) como la Artritis Reumatoide (AR) que origina cambios patogénicos en la membrana sinovial y hueso debido a mecanismos que involucran la producción de Anticuerpos Antiproteínas Citrulinadas (ACPAs), estimulados por péptidos modificados por enzimas Peptidil Arginina Deiminasas (PADs) humanas. Objetivo: Evaluar la expresión de enzimas homólogas de PADs (Hs- PADs) o Arginina Deiminasas (ADs) y citrulinomas en miembros de la microbiota humana, y determinar ACPAs microbianos y anticuerpos anti-Zonulina (AbsZON) en pacientes con AR. Material y Métodos: Se trata de un estudio de casos y controles no pareado realizado en Guadalupe, Zac., 10 casos confirmados con diagnóstico de AR seropositiva fueron comparados con 10 controles de tipo vecindario. Los métodos empleados fueron cultivos microbianos, Western blot (WB), ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) indirecto (ELISA-I) y competitivo (ELISA-C), elución y prueba de Óxido Nítrico. Se utilizaron 17 cepas microbianas y anticuerpos policlonales (pAbs) específicos del péptido sintético derivado de los residuos 100-200 de PAD2 humano (pAb anti-PAD2), y del fragmento recombinante de los aminoácidos 326 y 611 de PAD4 humano (pAb anti-PAD4), además de un pAb anti-citrulina humano, ACPAs de afinidad y sueros humanos; el análisis estadístico fue descriptivo e inferencial mediante las pruebas no paramétricas de Kruskal- Wallis y U de Mann-Whitney generadas en los programas SPSS y GraphPad Prism, además de Razón de Momios (RM) y coeficiente de correlación de Spearman (rs). Resultados: Patógenos de Firmicutes, Proteobacteria y Ascomycota albergan homólogos de PADs/ADs (Hs-PADs/ADs) y antígenos citrulinados (AgCIT), que fueron reactivos a ACPAs de pacientes con AR (casos) quienes además presentaron niveles elevados de AbsZON en comparación con los controles y asociación positiva con AR. Conclusión: Los citrulinomas microbianos y Hs-PADs/ADs son abundantes en el microbioma humano y podrían estar involucrados en la producción de ACPAs. Los AbsZON sugieren aumento en la PI identifica como posible factor de riesgo en AR. Los presentes hallazgos, podrían representar el vínculo molecular entre la disbiosis, la PI y la patogénesis de AR.