Citrulinación endógena y homólogos de PADs/ADs en miembros de la microbiota humana y anticuerpos anti-zonulina de pacientes con artritis reumatoide

Pérez Pérez, María Elena

Citrulinación endógena y homólogos de PADs/ADs en miembros de la microbiota humana y anticuerpos anti-zonulina de pacientes con artritis reumatoide

Pérez Pérez, María Elena

URI: http://ricaxcan.uaz.edu.mx/jspui/handle/20.500.11845/4299

Fecha: 2024

Resumen:

Introducción: El Microbioma humano es esencial en diversos procesos fisiológicos, incluida la inmunidad, no obstante, eventos disbióticos y aumento en la permeabilidad intestinal (PI) conducen al desarrollo de enfermedades autoinmunes (EAI) como la Artritis Reumatoide (AR) que origina cambios patogénicos en la membrana sinovial y hueso debido a mecanismos que involucran la producción de Anticuerpos Antiproteínas Citrulinadas (ACPAs), estimulados por péptidos modificados por enzimas Peptidil Arginina Deiminasas (PADs) humanas. Objetivo: Evaluar la expresión de enzimas homólogas de PADs (Hs- PADs) o Arginina Deiminasas (ADs) y citrulinomas en miembros de la microbiota humana, y determinar ACPAs microbianos y anticuerpos anti-Zonulina (AbsZON) en pacientes con AR. Material y Métodos: Se trata de un estudio de casos y controles no pareado realizado en Guadalupe, Zac., 10 casos confirmados con diagnóstico de AR seropositiva fueron comparados con 10 controles de tipo vecindario. Los métodos empleados fueron cultivos microbianos, Western blot (WB), ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) indirecto (ELISA-I) y competitivo (ELISA-C), elución y prueba de Óxido Nítrico. Se utilizaron 17 cepas microbianas y anticuerpos policlonales (pAbs) específicos del péptido sintético derivado de los residuos 100-200 de PAD2 humano (pAb anti-PAD2), y del fragmento recombinante de los aminoácidos 326 y 611 de PAD4 humano (pAb anti-PAD4), además de un pAb anti-citrulina humano, ACPAs de afinidad y sueros humanos; el análisis estadístico fue descriptivo e inferencial mediante las pruebas no paramétricas de Kruskal- Wallis y U de Mann-Whitney generadas en los programas SPSS y GraphPad Prism, además de Razón de Momios (RM) y coeficiente de correlación de Spearman (rs). Resultados: Patógenos de Firmicutes, Proteobacteria y Ascomycota albergan homólogos de PADs/ADs (Hs-PADs/ADs) y antígenos citrulinados (AgCIT), que fueron reactivos a ACPAs de pacientes con AR (casos) quienes además presentaron niveles elevados de AbsZON en comparación con los controles y asociación positiva con AR. Conclusión: Los citrulinomas microbianos y Hs-PADs/ADs son abundantes en el microbioma humano y podrían estar involucrados en la producción de ACPAs. Los AbsZON sugieren aumento en la PI identifica como posible factor de riesgo en AR. Los presentes hallazgos, podrían representar el vínculo molecular entre la disbiosis, la PI y la patogénesis de AR.

Descripción:

Introduction: The human microbiome it is essential in various physiological processes, including immunity; however, dysbiotic events and increased intestinal permeability (IP) lead to the development of autoimmune diseases (AID) such as Rheumatoid Arthritis (RA), which causes pathogenic changes in the synovial membrane and bone due to mechanisms that involve the production of Anti- Citrullinated Protein Antibodies (ACPAs), stimulated by peptides modified by human Peptidyl Arginine Deiminases (PADs) enzymes. Objective: To evaluate the expression of homologs enzymes of PADs (Hs-PADs) or Arginine Deiminases (ADs) and citrullinomas in members of the human microbiota, and to determine microbial ACPAs and anti-Zonulin antibodies (AbsZON) in patients with RA. Material and Methods: This was an unmatched case-control study conducted in Guadalupe, Zac., 10 confirmed cases with a diagnosis of seropositive RA were compared with 10 neighborhood-type controls. The methods used were microbial cultures, Western blot (WB), enzyme- linked immunosorbent assays (ELISA) indirect (I) and competitive (C), elution and Nitric Oxide test. We used 17 microbial species and specific polyclonal antibodies (pAbs) of the synthetic peptide derived from residues 100-200 of human PAD2 (anti- PAD2 pAb) and the recombinant fragment of amino acids 326 and 611 of human PAD4 (anti-PAD4 pAb), in addition to an human anti-citrulline pAb, affinity ACPAs and human sera; The statistical analysis was descriptive and inferential using the non- parametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U tests generated in the SPSS and GraphPad Prism programs. In addition to the Odds Ratio (OR) and Spearman correlation coefficient (rs). Results: Pathogens of Firmicutes, Proteobacteria, and Ascomycota harbor homologs of PADs/ADs and citrullinated antigens (AgCIT), which were reactive to ACPAs of RA patients (cases) who also presented elevated levels of AbsZON compared to controls and a positive association with RA. Conclusion: Microbial citrullinomas and Hs-PADs/ADs are extensive in the human microbiome and could be involved in the production of ACPAs. AbsZON suggest increased IP identified as a possible risk factor in RA. The present findings could represent the molecular link between dysbiosis, IP and RA pathogenesis.

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