Repositorio Dspace
Daño al ADN y sobreexpresión de p53 y hsp70 en leucocitos mononucleares humanos expuestos a rayos x
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.
Daño al ADN y sobreexpresión de p53 y hsp70 en leucocitos mononucleares humanos expuestos a rayos x
Cano Sánchez, Diego
Fecha:
2018
Resumen:
Los rayos X empleados en medicina son una herramienta importante en el radiodiagnóstico,
estas representan una fuente artificial significativa de exposición a la radiación ionizante para
la población en general. Sin embargo, aunque las radiografías de diagnóstico brindan grandes
beneficios, su uso implica un riesgo para desarrollar cáncer, generalmente aceptado por las
dosis y el número de exposiciones que han sido consideradas no despreciadas principalmente
para trabajadores de la salud. Se sabe que p53 es una molécula que dirige la corrección de
daño al ADN y hsp70 es una proteína correctora de daño molecular cuando las células son
sometidas a estrés. El objetivo del trabajo fue evaluar el daño al ADN así como la expresión
de p53 y Hsp70 en leucocitos mononucleares humanos expuestos a Rayos X. El modelo
biológico utilizado fue leucocitos mononucleares humanos de sangre periférica (LMHSP) y
aislados por ensayo de exclusión de pacientes clínicamente sanos, la viabilidad celular y la
cantidad celular inicial fueron evaluadas para cada dosis de exposición, se tomaron 14
alícuotas para el protocolo de exposición. Los leucocitos fueron expuestos a una fuente de
rayos X provenientes de un equipo Marca Corix ®, de 70 KVp-8mA y tiempo de exposición de
0.15s para diferentes dosis absorbida de: 2.3, 4.6, 9.1 y 13.7 mGy por triplicado. La respuesta
del daño al ADN se cuantificó mediante electroforesis con gel de agarosa, le expresión de la
p53 y Hsp-70 se realizó mediante PAGE-SDS Western Blot., para la identificación de p53 y
Hsp70 se utilizaron anticuerpos monoclonales específicos y se revelaron con DAB y H2O2, o
bien con ECL. Los resultados para viabilidad celular inicial fueron del 100% y la cantidad
celular fue de 88,333±4784 LMHSP. El comportamiento de viabilidad en el protocolo de
irradiación se observó una diferencia significativa de disminución en comparación con el
control negativo para las primeras tres exposiciones y en el comportamiento de la cantidad
celular se observó un decremento significativo para las dos últimas exposiciones. Para el
daño al ADN se observó un daño proporcional a la dosis de radiación recibida, aunque
significativo solo para las dosis de 9.1 ,13.7 mGy y control positivo (muestra sometida a estrés
calórico, 44°C/1hr). Además, se observó una expresión basal de p53 y Hsp70 en el control
negativo, y una sobreexpresión en las dosis de 9.1 y 13.7 mGy para p53 y Hsp70, así como
para el control positivo (44°C/1hr). Conclusión: los hallazgos permitieron estimar una
respuesta de daño molecular y que se pueden utilizar las proteínas p53 y hsp70 como
bioindicadores por exposición para usuarios de equipos de rayos X con esas características y
asume una importancia significativa en protección radiológica.
Descripción:
X-rays used in medicine are an important tool in radiodiagnosis, they represent a
significant artificial source of exposure to ionizing radiation for the general population.
However, although diagnostic radiographs offer great benefits, their use implies a risk to
develop cancer, generally accepted by the doses and the number of exposures that have
been considered not to be disregarded mainly for health workers. It is known that p53 is a
molecule that directs the correction of damage to DNA and hsp70 is a protein that corrects
molecular damage when cells are subjected to stress. The objective of the work was to
evaluate the damage to the DNA as well as the expression of p53 and Hsp70 in human
mononuclear leukocytes exposed to X-rays. The biological model used was peripheral
blood human mononuclear leukocytes (PBHML) and isolated by clinical exclusion of
patients. healthy, the cell viability and the initial cell quantity were evaluated for each
exposure dose, 14 aliquots were taken for the exposure protocol. The leucocytes were
exposed to a source of X-rays from a Corix ® equipment, of 70 KVp-8mA and exposure
time of 0.15s for different absorbed doses of: 2.3, 4.6, 9.1 and 13.7 mGy. The response of
DNA damage was quantified by agarose gel electrophoresis, p53 expression and Hsp-70
was performed by SDS-Western Blot PAGE, specific monoclonal antibodies were used for
the identification of p53 and Hsp70 and revealed DAB and H2O2, or with ECL. The results
for initial cell viability were 100% and the cellular amount was 88.333 ± 4784 LMHSP. The
feasibility behavior in the irradiation protocol was observed a significant difference of
decrease in comparison with the negative control for the first three exposures and in the
behavior of the cell quantity a significant decrease was observed for the last two
exposures. For damage to the DNA, damage was observed proportional to the dose of
radiation received, although significant only for the doses of 9.1, 13.7 mGy and positive
control (sample subjected to heat stress, 44 ° C / 1hr). In addition, a basal expression of
p53 and Hsp70 was observed in the negative control, and an overexpression in the doses
of 9.1 and 13.7 mGy for p53 and Hsp70, as well as for the positive control (44 ° C / 1hr).
Conclusion: the findings allowed estimating a molecular damage response and that p53
and hsp70 proteins can be used as bioindicators for exposure to users of X-ray equipment
with these characteristics and assumes a significant importance in radiological protection
Ficheros en el ítem
El ítem tiene asociados los siguientes ficheros de licencia:
Este ítem aparece en la(s) siguiente(s) colección(ones)
Excepto si se señala otra cosa, la licencia del ítem se describe como Atribución-NoComercial-CompartirIgual 3.0 Estados Unidos de América
Buscar en DSpace
Listar
-
Todo DSpace
-
Esta colección